Сюжет Resident Evil 5 разворачивается в Западной Африке, в вымышленном районе Кижуджу (Kijuju). После падения корпорации «Амбрелла» производство биологического оружия не прекращается, а скорее наоборот, набирает обороты. Для борьбы с биотерроризмом был создан отряд специального назначения BSAA (Bioterrorism Security Assessment Alliance), в котором состоят главные герои игры — Крис Редфилд (герой Resident Evil, Resident Evil Code: Veronica и Resident Evil: Umbrella Chronicles) и его партнёр по миссии Шева Аломар. Корпорация TriCell, основанная на руинах Амбреллы Альбертом Вескером, является одним из крупнейших представителей на рынке фармацевтических продуктов (а также биоорганического оружия, которое разрабатывается под этим прикрытием). План Вескера состоит в том, чтобы выпустить смертельный вирус при помощи огромного самолёта бомбардировщика, способного набирать высоту до верхних слоёв атмосферы.
Продюсер игры Дзюн Такэути, заявил, что геймплей RE5 такой же как и RE4. Игрок управляет персонажем Редфилда из-за плеча. Так же в игре существуют новые дополнения, делая игру по-настоящему реалистичной. Например, если Крис будет слишком долго находиться на солнце, он начнет видеть миражи и галлюцинации. Так же, в игре реализованы различные световые эффекты. Например, если игрок находился продолжительное время в темном или светлом помещении и переходит из одной области в другую, то он теряет зрение на короткий промежуток времени, пока глаза персонажа не адаптируются.
В игре представлен новый тип врагов. Как можно увидеть в трейлере — они очень быстры и владеют различными видами оружия. Существенно доработан интеллект противников и они будут отличаться от тупых зомби и марионеточных ганадос. В интервью с Xbox360, Kenji Inafune кратко заявил, что в игре будут и интерактивные элементы.
Также в игре существует режим совместного прохождения (co-op), в котором один из игроков управляет Крисом, а другой играет за девушку по имени Шева Аломар (Sheva Alomar).
Выход на PC IV Квартал